To najsłynniejsze dzieło Simone Martini zostało wykonane na ołtarz św. Ansania w katedrze w Sienie. Nieziemska atmosfera Zwiastowania jest podkreślona przez jaskrawe złote tło sceny.
Na górze obrazu, pod centralnym łukiem w koronie cherubinów, przedstawia gołębicę – symbol Ducha Świętego.
Boskiemu posłannikowi, przekazującemu Maryi dobrą nowinę, i Marii wydają się towarzyszyć złote litery powitania: Ave gratia plena dominus tecum “. Maria siedzi na drewnianym inkrustowanym tronie, którego przestrzenne rozmieszczenie, podobnie jak złożona książka w lewej ręce Maryi, podkreśla rzeczywistość jej wizerunku.
Postać Maryi, która słucha dobrej nowiny, została napisana w przewiewny, uduchowiony sposób, choć jej ciemnoniebieski płaszcz i karminowo-czerwone ubrania wychodzące spod niej kontrastują z olśniewającym blaskiem całej sceny. Postać anioła, ubranego w brokatową szatę, podkreślają skrzydła z pawimi piórami na złotym tle i kapryśne fałdy ozdobnie wijącego się płaszcza.
Po obu stronach ołtarza znajdują się figury świętych: po lewej – św. Ananiasz, któremu poświęcono ten ołtarz, a po prawej, według napisu z ubiegłego stulecia, jest przedstawiony na św. Yulitta Te dwie postacie są napisane bardziej plastycznie, jak obrazy proroków w medalionach szczytów, więc niektórzy wybitni badacze przypisują je do Lippo Memmi, których imię można odczytać w dolnej ramce zdjęcia obok imienia Simone Martini.
Jednak wydaje się bardziej prawdopodobne, że Lippo Memmi wykonało jedynie złocenie i dekorację ołtarza, a obraz był w całości własnością Simone Martini, która z dwu stronnymi figurami, bardziej rzeźbiona i realistyczna, chciała podkreślić nadprzyrodzony charakter sceny centralnej.